中等强度跑台运动干预型糖尿病模型大鼠肝脏和(2)

1.5 主要观察指标 注射链脲佐菌素第7天，检测以下指标：①尾静脉取血测量各组大鼠随机血糖；②苏木精-伊红染色及Masson染色观察肝细胞形态；③免疫组化法观察肝组织α-SMA的表达；④摘眼球取血检测Ⅳ型胶原水平。

1.6 统计学分析 使用SPSS 20.0统计软件对分组测量得到的数据进行处理，计量资料用±s表示，组间比较采用单因素方差分析，P＜ 0.05为差异有显著性意义。

2 结果 Results

2.1 实验动物数量分析 实验所用大鼠30只，均未发生感染、脱失，全部进入结果分析。

2.2 各组随机血糖 注射链脲佐菌素第7天，使用三诺血糖仪及配套试纸，尾静脉取血检测各组大鼠的随机血糖，随机血糖大于16.7 mmol/L认定为成模大鼠[7-8]。与正常对照组和糖尿病运动干预组相比，糖尿病对照组大鼠出现多饮、多食、多尿，精神不振、毛色暗淡、生长迟缓、身体消瘦等糖尿病症状。糖尿病对照组、糖尿病运动干预组大鼠随机血糖明显高于正常对照组(P＜ 0.05)，糖尿病运动干预组血糖低于糖尿病对照组(P＜ 0.05)，见表1。

2.3 苏木精-伊红染色结果 正常对照组肝小叶结构清晰，肝板明显，细胞核呈圆形，大小均匀，核膜完整，核仁清晰，肝索呈放射状规则排列，无空泡变性，肝血窦大小正常，汇管区胆小管无增生情况；糖尿病对照组肝小叶结构紊乱，边界不清晰，可见脂肪空泡，肝细胞出现水样变性，细胞出现坏死，细胞核固缩，肝血窦扩张，汇管区胆小管发生明显增生，并可见成纤维细胞增生；糖尿病运动干预组肝小叶结构、肝细胞索状结构排列尚清晰，可见肝板，无明显脂肪空泡，肝血窦狭窄，汇管区胆小管发生轻微增生，见图1。

2.4 Masson染色结果 正常对照组肝小叶结构正常，肝细胞未发生肿胀，未见明显蓝染纤维；糖尿病对照组肝组织出现脂肪空泡，肝小叶结构严重破坏，出现水样变，肝细胞间隙变宽，肝脏淤血，汇管区可见明显蓝染胶原纤维，肝细胞间可见轻度蓝染胶原纤维；糖尿病运动干预组肝小叶结构比较正常，未见明显脂肪空泡，肝细胞出现水肿增大，肝细胞间隙未见明显蓝染胶原纤维，见图2。

2.5 α-SMA在各组大鼠肝组织中的表达正常对照组肝组织α-SMA蛋白多表达于小动脉及小静脉，在胆管表达较少；糖尿病对照组主要表达于汇管区及纤维间隔；糖尿病运动干预组在汇管区表达较少。图像分析软件测得结果显示，糖尿病对照组、糖尿病运动干预组累计吸光度值较正常对照组明显增多(P＜ 0.05)，糖尿病运动干预组较糖尿病对照组明显减少(P＜ 0.05)，见图3，表2。

图1 ｜各组大鼠肝组织苏木精-伊红染色(×200)Figure 1 ｜Hematoxylin-eosin staining of rat liver cells (×200)图注：图中A，C，E为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病运动干预组肝细胞结构；B，D，F为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病运动干预组胆小管结构

图2 ｜各组大鼠肝组织Masson染色(×200)Figure 2 ｜Masson staining of rat liver cells (×200)图注：图中A，B，C分别为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病运动干预组。糖尿病对照组肝组织出现脂肪空泡，肝小叶结构严重破坏，汇管区可见明显蓝染胶原纤维，肝细胞间可见轻度蓝染胶原纤维；糖尿病运动干预组肝小叶结构比较正常，未见明显脂肪空泡，肝细胞出现水肿增大，肝细胞间隙未见明显蓝染胶原纤维

图3 ｜各组大鼠肝组织α-SMA表达(免疫组织化学染色，×200)Figure 3 ｜Expression of α-smooth muscle actin in rat liver tissues (immunohistochemical staining, ×200)图注：图中A，B，C分别为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病运动干预组。正常对照组肝组织α-SMA蛋白多表达于小动脉及小静脉，在胆管表达较少；糖尿病对照组主要表达于汇管区及纤维间隔；糖尿病运动干预组在汇管区表达较少

表1 ｜各组大鼠随机血糖比较 (±s)Table 1 ｜Comparison of random blood glucose level of rats among groups表注：与正常对照组比较，aP＜ 0.05，与糖尿病对照组比较，bP＜ 0.05组别 n 随机血糖(mmol/L)正常对照组 10 4.糖尿病对照组 10 22.糖尿病运动干预组 10 16.

表2 ｜各组大鼠肝组织α-SMA的表达水平 (±s)Table 2 ｜Expression level of α-smooth muscle actin in rat liver tissue表注：与正常对照组比较，aP＜ 0.05，与糖尿病对照组比较，bP＜ 0.05组别 n 累计吸光度值正常对照组 10 822.糖尿病对照组 10 2 158.糖尿病运动干预组 10 1 498.

2.6 各组大鼠血清Ⅳ型胶原水平 与正常对照组相比，糖尿病对照组大鼠血清Ⅳ型胶原水平升高(P＜ 0.05)；与糖尿病对照组相比，糖尿病运动干预组大鼠血清Ⅳ型胶原水平降低(P＜ 0.05)，见表3。

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